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8-9
如今檢查ELISA有很多路徑,咱們能夠依據(jù)自個的偏好進行挑選。一般ELISA檢查的是酶促反響的可溶性產品,抗體上聯(lián)絡有相應的酶(例如一般運用的辣根過氧化物酶HRP),而反響系統(tǒng)中添加有相應的底物(如3,3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。ELISA試劑盒雖然有多種類型,不過它們都有一個一同特征,就是進行抗原捕獲。一般捕獲辦法包含將抗原吸附到微孔板或許用微孔板上的抗體進行捕獲。In-cellELISA和酶聯(lián)免疫斑駁ELISPOT是兩種分外的類型,In-cellELISA需求將微孔板中培育...
7-15
洗板機是用于清洗酶標板中殘留溶液的儀器,酶標板是否清洗干凈是決定酶標分析儀檢測結果是否正確的關鍵因素之一。它具有精密性、可靠性、自動化程度高、操作簡單等特點。一、洗板機的主要計量特性:①殘液量:≤2L/孔。②加液誤差:整板加液每孔300μL時,≤±5%。③加液重復性:整板加液每孔300μL時,CV≤5%。二、洗板機的校準條件:①環(huán)境條件實驗室溫度為(20±5)℃,室內溫度變化≤1℃/h,無強電磁場干擾,無風、無振動,無強光直接照射,平坦、堅固的檢測...
6-20
ELISA試劑盒的運用關鍵:1、依照闡明書中標明的時刻、加液的量及次序進行溫育操作。2、運用潔凈的塑料容器裝備洗滌液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。3、試劑應按標簽闡明書貯存,運用前康復到室溫。稀稀往后的規(guī)范品應丟掉,不可保存。4、標本因為冷藏時IgG聚組成多聚體,F(xiàn)ib非特異性吸附,重復凍融機械切力致使蛋白分子受損。5、試驗中不必的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,防止蛻變。6、運用一次性的吸頭防止穿插污染,吸取停止液和底物A、B液時,防止運用帶金屬部分的加樣器。...
6-4
ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃等。37℃是試驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結合的適宜溫度。在樹立ELISA方法作反響動力學研究時,試驗標明,兩次抗原抗體反響一般在37℃經1~2小時,產品的生成可達高峰。為加快反響,可進步反響的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜選用更高的溫度。抗原抗體反響4℃更為*,在放射免疫測定中多使反響在冰箱中過夜,以構成較多的沉淀。但因所需時刻太長,在ELISA試劑盒中一般不予選用。ELISA試劑盒的保溫方法除有...
5-28
ELISA試劑盒測定值與文獻中相差太大怎么辦,下面看看我們來仔細說說:(1)生化測定主要目的是比較處理內和處理間該指標的變化。同時,要測定值,往往是很可能甚至不可能的。因此,追求的不是值而是相對值。(2)用不同測定方法和不同測定條件下得到的測定值可能存在很大差異。因此,如果測定方法不同,同一樣品的測定值通常是不可以直接比較的。這也是建議使用試劑盒測定的理由之一。因為不同作者用同一試劑盒測定的數(shù)據(jù)才是可以相互比較的。(3)同一種材料,不同處理、不同發(fā)育狀態(tài)和不同器官其生化指標可...
5-28
ELISA試劑盒的樣品收集、處理及保存方法:1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-...
5-24
ELISA試劑盒的保存方法:1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍...
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